Novo método de análise de proteínas
O processo pode ser utilizado universalmente sem necessidade de equipamento especializado dispendioso
Uma equipa internacional liderada pelo Centro Médico Universitário de Hamburgo-Eppendorf (UKE) desenvolveu um novo método para a análise de alta resolução de amostras de tecidos. Com o método "Pathology-orientated MultiPlexing (PathoPlex)", podem ser analisadas simultaneamente mais de 100 proteínas diferentes numa única amostra de tecido. O método pode ser utilizado universalmente sem necessidade de equipamento especializado dispendioso. Os cientistas esperam que o novo método possa ser utilizado para identificar alterações causadoras de doenças nos rins, por exemplo, e permitir terapias personalizadas. Os investigadores liderados pelo Prof. Dr. Victor Puelles da III Clínica Médica e Policlínica da UKE, com a participação do Instituto de Biologia de Sistemas Médicos, publicaram o seu estudo na revista Nature.
Avanço tecnológico com resolução excecional
O PathoPlex funciona em ciclos de repetição por etapas: primeiro, diferentes proteínas são marcadas com anticorpos, depois são obtidas imagens, os anticorpos são removidos e inicia-se o ciclo seguinte para corar outras proteínas. No estudo, os investigadores efectuaram um total de 95 ciclos de imagem. Utilizando microscopia confocal, foi captado um total de 600 mil milhões de pixéis com uma resolução de 80 nm - cerca de 1000 vezes mais pequena do que um cabelo humano.
"Uma das principais vantagens do PathoPlex é a sua compatibilidade com quase todos os microscópios de fluorescência - desde microscópios simples de campo alargado a sistemas confocais de alta resolução", afirma o líder do estudo e último autor, Prof. O método utiliza anticorpos disponíveis no mercado e pode processar até 40 amostras de arquivo em paralelo. Para lidar com as grandes quantidades de dados, os investigadores desenvolveram o software "spatiomic", que identifica automaticamente padrões de co-expressão de proteínas, permite análises espaciais e está disponível gratuitamente.
Novas perspectivas sobre as doenças renais
Ao investigarem as doenças renais diabéticas com o PathoPlex, os cientistas identificaram sinais de stress nos túbulos renais como novos efeitos potencialmente causadores de doenças. Foram também detectadas alterações em doentes com diabetes de tipo 2 sem perda da função renal - um passo importante para melhorar a deteção precoce e o tratamento das complicações da diabetes. O método também se revelou adequado para avaliar o efeito de medicamentos antidiabéticos, como os inibidores SGLT2, neste grupo de doentes.
Colaboração internacional
O estudo multidisciplinar foi uma colaboração entre o UKE e a Universidade de Aarhus (Dinamarca), bem como numerosos investigadores internacionais no Japão, Alemanha, Austrália, França, Suíça e EUA. O projeto foi financiado pela Fundação Alemã de Investigação e pelo Ministério Federal Alemão da Investigação, Tecnologia e Espaço, entre outros.
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Publicação original
Kuehl, Puelles et al. Pathology-oriented multiplexing enables integrative disease mapping. Nature. 2025.
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