PATfix® - AAV Platform

Die PATfix^® AAV-Plattform bietet einen konsolidierten analytischen Arbeitsablauf für die Downstream-Prozessentwicklung und Qualitätskontrolle von Adeno-assoziierten Viren. Sie basiert auf qualifizierten chromatographischen Methoden und Multi-Detektor-Analytik und ermöglicht eine schnelle Bewertung von der Ernte bis zur Abfüllung und Fertigstellung mit minimaler Probenvorbereitung.

Vier Methoden decken die wichtigsten analytischen Anforderungen von AAV DSP ab: Der Nachweis von Verunreinigungen erfolgt mittels Größenausschlusschromatographie auf BIA SEC Methacrylat-2000A für die qualitative Überwachung von Proteinen, DNA/RNA, Aggregaten und Komplexen. Total Viral Capsids verwendet die Kationenaustauschchromatographie mit CIMac SO3 zur serotypunabhängigen Bestimmung der gesamten AAV-Kapside von AAV2, AAV5, AAV6, AAV8 und AAV9. Die Empty/Full-Prozessentwicklung mit CIMac QA HR ermöglicht eine grundlegende Trennung von leeren und vollen Kapsiden und skaliert von der analytischen zur präparativen Arbeit. Die AAV8-Produktreinheit ermöglicht eine präzise Quantifizierung von vollständigen AAV8-Kapsiden mit einer LOQ von 1,5E+09 vg/mL, einer Linearität von 5E+09 bis 5E+10 vg/mL und einer RSD < 15 % gemäß EMA- und FDA-Richtlinien.

Die Multi-Detektor-Konfiguration umfasst UV-Absorption (190-700 nm), kontaktlose Leitfähigkeits- und pH-Sonden sowie optionale Fluoreszenz für Proteinsignaturen und Wirtszell-DNA-Analyse. Das optionale MALS-System identifiziert selektiv AAV-Kapside und -Aggregate und unterstützt die Berechnung der Wiederfindung. Die Hardware mit einer quaternären Niederdruck-Gradientenpumpe, einem Autosampler für 108 Fläschchen (4-40°C) und einem Säulenthermostat (5-85°C) gewährleistet eine robuste Routineanalytik.

Die PATfix^®-Software bietet 21 CFR Part 11-Konformität, Vorlagen für die Datenextraktion und eine einheitliche Datenbank für Chromatogramme von mehreren Geräten. Methoden und SOPs mit Pufferrichtlinien (WO2024252024A1, WO2025073922) reduzieren die Variabilität und standardisieren die Analyse ab acht Minuten pro Probe.

Orthogonale Validierungen zeigen eine enge Übereinstimmung mit Dichtegradienten-Ultrazentrifugation, TEM, CD-MS und dPCR/ELISA für AAV8-Proben. Durch die Konsolidierung der Verunreinigungsdetektion, der Gesamtkapsidrückgewinnung und der Leer-/Voll-Analytik unterstützt diese Plattform datengesteuerte Entscheidungen bei der AAV-Prozessentwicklung. Fordern Sie Methodendetails, SOPs und Anwendungshinweise zur Integration der At-Line-Analytik in Ihre DSP an.