Marquage plus rapide et plus clair des protéines avec le nouvel outil SNAP-tag2

Le nouveau système de marquage fonctionne efficacement dans une large gamme d'applications de bio-imagerie et ouvre de nouvelles possibilités pour l'imagerie multicolore

21.07.2025

La protéine SNAP-tag est un outil puissant pour marquer les protéines avec des fluorophores synthétiques pour la bio-imagerie. Des scientifiques de l'Institut Max Planck pour la recherche médicale à Heidelberg ont mis au point une version nettement améliorée, appelée SNAP-tag2, ainsi que des substrats optimisés pour un marquage plus rapide dans les cellules vivantes.

 © MPI for Medical Research

Par rapport au SNAP-tag couramment utilisé, le SNAP-tag2 offre une capacité de marquage considérablement améliorée en utilisant des techniques d'imagerie de microscopie à super-résolution telles que la microscopie STED (images de droite).

Un mutant SNAP-tag hautement modifié

Les étiquettes de protéines auto-marquées telles que SNAP-tag permettent d'attacher des fluorophores synthétiques brillants et photostables à des protéines d'intérêt en vue d'une analyse ultérieure. sont largement utilisés en biochimie.

"SNAP-tag a été développé à l'origine à partir d'une enzyme humaine de réparation de l'ADN. La poursuite de l'ingénierie d'une protéine déjà fortement modifiée a été l'un des plus grands défis", explique Stefanie Kühn, qui a dirigé l'équipe du projet composée d'autres scientifiques de l'Institut Max Planck (MPI) pour la recherche médicale, notamment Julien Hiblot, Veselin Nasufovic et le directeur Kai Johnsson, ainsi que d'une équipe de l'université de Groningue. "En outre, nous voulions trouver un noyau de substrat qui fonctionne bien dans les cellules auxquelles sont attachés différents fluorophores. Nous avons décidé de combiner l'optimisation du substrat et l'ingénierie des protéines pour développer SNAP-tag2."

Une réactivité accrue

L'utilité du SNAP-tag, largement utilisé jusqu'à présent, dans les applications sur cellules vivantes peut être limitée par sa cinétique de marquage relativement lente et la perméabilité cellulaire limitée de ses substrats. Les scientifiques du MPI pour la recherche médicale ont voulu trouver une solution à ce problème. SNAP-tag2 réagit rapidement avec les nouveaux substrats perméables aux cellules : Il présente une constante de vitesse de marquage qui correspond à une amélioration de 100 fois par rapport aux paires SNAP-tag-substrat comparables.

Marquage par fluorescence plus efficace dans les cellules vivantes

Le SNAP-tag2 offre d'autres avantages. Lorsqu'il est marqué avec des colorants hautement fluorogènes, il présente également une luminosité de fluorescence 5 fois supérieure à celle du SNAP-tag actuellement utilisé. La cinétique de marquage plus rapide et la luminosité de SNAP-tag2 se traduisent par une performance nettement améliorée dans les cellules de mammifères et de levures. Elle permet également d'utiliser des techniques d'imagerie par microscopie à super-résolution telles que la microscopie STED et de travailler avec d'autres types de cellules connues pour être réfractaires au marquage chimique, telles que les cellules de levure.

"SNAP-tag2 et ses substrats améliorés sont supérieurs aux versions de SNAP-tag précédemment utilisées dans toutes les applications que nous avons testées, et nous espérons qu'ils excelleront également dans les applications in vivo ", déclare Stefanie Kühn.

D'autres domaines d'application possibles

En résumé, l'équipe s'attend à ce que les améliorations apportées à SNAP-tag2 fassent progresser l'utilité de cet outil déjà largement adopté pour l'imagerie des cellules vivantes et d'autres applications dans les sciences de la vie. En outre, SNAP-tag2 ouvre de nouvelles possibilités pour les applications d'imagerie multicolore.

Note: Cet article a été traduit à l'aide d'un système informatique sans intervention humaine. LUMITOS propose ces traductions automatiques pour présenter un plus large éventail d'actualités. Comme cet article a été traduit avec traduction automatique, il est possible qu'il contienne des erreurs de vocabulaire, de syntaxe ou de grammaire. L'article original dans Anglais peut être trouvé ici.

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