Eva Rubio-Marrero, Danyang Huang and Girish Pendse, Celgene Corporation, Summit, NJ Hongshan Li and Sriram Kumaraswamy, FortéBio, Fremont, CA

Jetzt verfügbar – Einfache Evaluierung von bispezifischen Antikörpern

Bindungsspezifische Analyse und Quantifizierung von BsMAbs in einem einzigen Hochdurchsatz-Assay

Die Produktion von bispezifischen Antikörpern stellt eine Herausforderung im Zelllinien-Screening dar, da viele weitere Antikörper-Konformationen von den Zellen produziert werden können. Basiert das Screening nur auf Protein-A-Titer, können gute Pools und Kandidaten unbewusst verworfen werden. Aus diesem Grund wurde ein Hochdurchsatz-Assay mit dem Octet® HTX-System entwickelt. Das Assay erlaubt die Identifizierung von Pools und Klonen, die bispezifische Antikörper in erhöhten Konzentrationen produzieren.

Der neuartige BLI-Ansatz bietet eine einfache und benutzerfreundlichen Screening-Methode. Diese erlaubt die Charakterisierung der BsMAb-Interaktionen markierungsfrei und in Echtzeit.

Derzeit gibt es eine Einschränkung bei Technologien, die eine quantitative funktionelle Evaluierung von zwei Wechselwirkungen mit einem bispezifischen Molekül ermöglichen. Das AppNote beschreibt eine einfache Methode zur effizienten BsMAb-Analyse unter Verwendung von Protein A und HIS1K Biosensoren.

Durch die Analyse spezifischer Bindungsergebnisse zusätzlich zum IgG-Titer in einem einzigen Hochdurchsatz-Assay kann die Bindungsaktivität eines bispezifischen Moleküls an beide Targets beurteilt werden. Dies hilft die Top-Pools/Klone während der Zelllinienentwicklung zu bewerten. Die Ergebnisse des Assays wurden mit anderen Analysemethoden wie RP-HPLC, CE-SDS, SPR und LC-MS validiert. Es konnte gezeigt werden, dass die BLI-Bindungsergebnisse mit aufgereinigtem Probenmaterial korreliert werden können.

Fakten, Hintergründe, Dossiers
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