Prueba rápida para la determinación de anticuerpos contra Sars-Cov-2
No es necesario tomar precauciones detalladas en materia de bioseguridad
Para determinar la inmunidad al SARS-CoV-2 y la eficacia de las posibles vacunas, debe determinarse la cantidad de anticuerpos neutralizantes en la sangre de los individuos recuperados o vacunados. Una prueba de neutralización tradicional suele durar de dos a tres días y debe realizarse con coronavirus infecciosos en un laboratorio que cumpla con el nivel 3 de bioseguridad. Un equipo de investigación suizo-alemán de Berna y Bochum ha lanzado una prueba que sólo dura 18 horas y no tiene altos requisitos de bioseguridad.
Ferdinand Zettl y Gert Zimmer de la IVI frente a una imagen de la prueba desarrollada por ellos con células verdes fluorescentes.
© FSVO/Renate Boss
La prueba fue desarrollada en el Instituto de Virología e Inmunología (IVI) de la Universidad de Berna y la Oficina Federal Suiza de Seguridad Alimentaria y Salud Animal, y fue evaluada en cooperación con colegas de la Universidad del Ruhr-Universität Bochum (RUB) utilizando muestras de suero de pacientes de Covid-19.
Disfrazando un virus inofensivo como Sars-Cov-2
Para detectar los anticuerpos contra el Sars-Cov-2, los investigadores utilizaron otro virus que no se propaga. Intercambiaron la proteína de la envoltura de este virus por la proteína de punta del nuevo coronavirus, que media la entrada del virus y la infección. "Como resultado, los virus pueden ser identificados por los anticuerpos contra el Sars-Cov-2", explica la autora principal Toni-Luise Meister del Departamento de Virología Molecular y Médica de la Ruhr-Universität Bochum. "Los anticuerpos se unen a los virus que han sido alterados de esta manera y los neutralizan para que ya no puedan penetrar en las células anfitrionas".
La luminiscencia ayuda a determinar la inmunidad
Dado que el virus seudotípico de esta manera no puede propagarse en las células huéspedes, no es necesario tomar precauciones de bioseguridad elaboradas para la prueba. Para determinar la cantidad de anticuerpos, los investigadores modificaron genéticamente el virus para que las células infectadas produjeran una proteína verde fluorescente y una luciferasa, una enzima de las luciérnagas. "Después de una sola ronda de infección, podemos entonces determinar cuántas células muestran fluorescencia verde", dice el autor principal Ferdinand Zettl del Instituto de Virología e Inmunología de Berna. La fluorescencia verde es un indicador de infección con el virus pseudotipo. Cuantas menos células verdes encuentren los investigadores, más anticuerpos neutralizantes estarán presentes que bloqueen el virus. Además, se puede utilizar un luminómetro para leer la señal de luminiscencia producida por la enzima luciferasa, otra forma de evaluar la prueba.
Rápido y fiable
Para comprobar la fiabilidad y comparabilidad con la prueba de neutralización convencional, los investigadores la aplicaron a muestras de sangre de pacientes de Covid-19. "La comparación directa mostró una buena correlación entre los dos sistemas de prueba", explica la autora correspondiente, la profesora Stephanie Pfänder del Departamento de Virología Molecular y Médica de la RUB. En comparación con las 56 horas de la prueba convencional, la nueva prueba es mucho más rápida, con sólo 18 horas para el resultado de la prueba. "Otra gran ventaja es que se puede realizar en casi todos los laboratorios médicos, ya que no se necesitan sofisticadas precauciones de seguridad", señala el Dr. Gert Zimmer del Instituto de Virología e Inmunología de Berna, autor correspondiente del estudio.
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