Imágenes más rápidas, nítidas y sencillas gracias a los «colorantes autoparpadeantes»
Un equipo de investigación desarrolla un nuevo enfoque para el uso de nanocuerpos en la microscopía de superresolución
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Los nanocuerpos son fragmentos de anticuerpos extremadamente pequeños que se unen a moléculas específicas. Cuando los nanocuerpos se marcan con colorantes, pueden utilizarse como sondas para mejorar la microscopía de superresolución. Sin embargo, los colorantes intermitentes convencionales suelen ofrecer un rendimiento deficiente cuando se unen a los nanocuerpos, lo que limita sus ventajas prácticas. Un equipo internacional de investigación liderado por la Universidad de Gotinga y el Centro Médico Universitario de Gotinga (UMG) ha demostrado ahora que los colorantes autopulsantes —que pueden alternar por sí mismos entre estados brillantes y oscuros— superan esta limitación. Este nuevo enfoque combina la alta precisión de marcaje de los nanocuerpos con la obtención de imágenes robusta y sencilla que ofrecen los colorantes autopulsantes, lo que simplifica los experimentos y mejora la reproducibilidad y el alto rendimiento de la microscopía de superresolución. Los resultados se han publicado en la revista *Nano Letters*.
La imagen de la izquierda muestra una imagen de superresolución obtenida mediante nanocuerpos con un colorante intermitente convencional (en la que el efecto intermitente es deficiente), mientras que la imagen de la derecha muestra un colorante autointermitente que permite obtener una mejor calidad de imagen. Ambas imágenes muestran microtúbulos, parte de la red estructural interna que ayuda a las células a mantener su forma y a organizar el transporte, en células U2OS humanas, una línea celular de laboratorio muy utilizada.
Roman Tsukanov and the original publication in Nano Letters (2026) DOI: 10.1021/acs.nanolett.6c02799
Un colorante autoparpadeante es una molécula fluorescente que alterna espontáneamente entre un estado brillante («encendido») y un estado oscuro («apagado»). Este parpadeo es esencial para la microscopía de superresolución, ya que permite detectar moléculas fluorescentes individuales una tras otra y localizarlas con gran precisión. Los colorantes convencionales también pueden parpadear, pero suelen necesitar tampones químicos especialmente preparados y condiciones de obtención de imágenes cuidadosamente controladas. Además, uno de los colorantes más utilizados ofrece un rendimiento deficiente cuando se une a los nanocuerpos, lo que da lugar a una mala calidad de imagen. «Los nanocuerpos ofrecen una precisión excelente, pero su uso en la microscopía de superresolución se ha visto limitado por el bajo rendimiento de los colorantes intermitentes convencionales», afirma el Dr. Felipe Opazo, del Centro de Imagen Bioestructural de la Neurodegeneración (BIN) de la UMG. «La combinación de nanocuerpos con colorantes autoparpadeantes mantiene una alta precisión de marcaje al tiempo que restaura un parpadeo robusto, lo que hace que la obtención de imágenes de superresolución sea más sencilla, más reproducible y más fácil de utilizar».
El equipo demostró que este enfoque funciona con diferentes técnicas de microscopía de superresolución, incluidas algunas de las técnicas de microscopía de fluorescencia más precisas disponibles en la actualidad. La aplicación satisfactoria en el microscopio MINFLUX pone de relieve el potencial del método, desde la microscopía de superresolución convencional hasta la nanoscopia de vanguardia.
«Nuestro objetivo es facilitar el uso de la microscopía de superresolución más allá de los laboratorios especializados en microscopía», afirma el Dr. Roman Tsukanov, investigador postdoctoral sénior de la Universidad de Gotinga. «Los colorantes autoparpadeantes simplifican considerablemente el flujo de trabajo de obtención de imágenes y reducen las barreras de acceso al campo de la microscopía de superresolución para los investigadores que no son expertos en microscopía, incluidos biólogos, químicos, médicos y profesionales de otros campos de investigación». Este trabajo consolida los colorantes de nanocuerpos autopulsantes como un método versátil para obtener imágenes a nanoescala precisas, fiables y accesibles.
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