PATfix® - AAV Platform

La piattaforma ^PATfix® AAV offre un flusso di lavoro analitico consolidato per lo sviluppo di processi a valle e il controllo di qualità dei virus adeno-associati. Basata su metodi cromatografici qualificati e su analisi multi-detector, consente una valutazione rapida dal raccolto al riempimento e alla finitura con una preparazione minima dei campioni.

Quattro metodi rispondono alle esigenze analitiche fondamentali dell'AAV DSP: il rilevamento delle impurità utilizza la cromatografia a esclusione dimensionale su BIA SEC Methacrylate-2000A per il monitoraggio qualitativo di proteine, DNA/RNA, aggregati e complessi. Capside virale totale impiega la cromatografia a scambio cationico con CIMac SO3 per la determinazione indipendente dal sierotipo del capside totale di AAV tra AAV2, AAV5, AAV6, AAV8 e AAV9. Lo sviluppo del processo Empty/Full con CIMac QA HR stabilisce la separazione di base dei capside vuoti e pieni e consente di passare dal lavoro analitico a quello preparativo. AAV8 Product Purity fornisce una quantificazione precisa dei capside AAV8 completi con LOQ a 1,5E+09 vg/mL, linearità da 5E+09 a 5E+10 vg/mL e RSD < 15% secondo le linee guida EMA e FDA.

La configurazione multi-detector comprende l'assorbanza UV (190-700 nm), le sonde di conducibilità e pH senza contatto, oltre alla fluorescenza opzionale per la firma delle proteine e l'analisi del DNA della cellula ospite. Il MALS opzionale identifica selettivamente i capside e gli aggregati di AAV e supporta i calcoli di recupero. L'hardware, dotato di pompa quaternaria a bassa pressione a gradiente, autocampionatore per 108 fiale (4-40°C) e termostato della colonna (5-85°C), garantisce una robusta analisi di routine.

Il software ^PATfix® garantisce la conformità alla normativa 21 CFR Part 11, modelli per l'estrazione dei dati e un database unificato per i cromatogrammi provenienti da più strumenti. Metodi e SOP con linee guida per i tamponi (WO2024252024A1, WO2025073922) riducono la variabilità e standardizzano l'analisi a partire da otto minuti per campione.

Le convalide ortogonali mostrano una stretta concordanza con l'ultracentrifugazione a gradiente di densità, la TEM, la CD-MS e la dPCR/ELISA per i campioni di AAV8. Consolidando il rilevamento delle impurità, il recupero del capside totale e l'analisi vuoto/pieno, questa piattaforma supporta le decisioni guidate dai dati nello sviluppo del processo AAV. Richiedete i dettagli del metodo, le SOP e le note applicative per integrare l'analisi in linea nel vostro DSP.