Verificado
Sistemas de la hidrólisis:
Discover, Mars 6, Discover SP-D
Hidrólisis de proteínas acelerada por microondas: acorta el tiempo de hidrólisis a unos minutos
La hidrólisis de proteínas es un procedimiento de digestión de proteínas y péptidos probado desde los años 50 (Stein y Moore) para analizar aminoácidos. El análisis de aminoácidos (AAA) se utiliza para cuantificar los aminoácidos individuales de la muestra respectiva y es un requisito previo para identificar la secuencia de aminoácidos de la proteína/péptido.
El paso de hidrólisis se realiza normalmente a una temperatura de 110 °C con ácido clorhídrico 6N y rompe todos los enlaces entre los aminoácidos individuales de la proteína/péptido que se va a analizar. Este paso requiere mucho tiempo y suele durar entre 20 y 24 horas. Además, se crean condiciones de reacción inertes para que el oxígeno del aire no pueda reaccionar con los aminoácidos. Este paso de hidrólisis puede llevarse a cabo en fase gaseosa para lograr límites de detección bajos, especialmente para cantidades de muestra pequeñas (500 picomoles/100 µg). Las cantidades de muestra mayores suelen procesarse en contacto directo con ácido clorhídrico (hidrólisis en fase líquida).
Con la ayuda de la hidrólisis de proteínas asistida por microondas, la hidrólisis líquida en el Mars 6 o el Discover SP-D, así como la hidrólisis en fase gaseosa en el Discover, pueden llevarse a cabo de forma rápida y cuidadosa.
Tecnologías de hidrólisis
Hidrólisis en fase gaseosa
Con la ayuda de la tecnología de microondas, se pueden conseguir varias ventajas con este método de trabajo establecido:
- El tiempo que se ahorra utilizando la tecnología de microondas también es enorme en la hidrólisis de proteínas. En lugar de ejecutar las reacciones de descomposición durante toda la noche, las microondas pueden lograr resultados comparables en sólo 15 minutos.
- La eficacia de la digestión aumenta. En particular, la digestión de proteínas hidrófobas se ha mejorado notablemente con la activación por microondas.
- Se pueden utilizar hasta 10 viales estándar de HPLC con automuestreador (100 - 300 µl) en un solo ciclo. Cada 15 minutos se pueden hidrolizar de nuevo 10 muestras, lo que permite obtener un rendimiento de muestras extremadamente elevado.
Hidrólisis líquida
La hidrólisis de proteínas se utiliza para escindir todos los compuestos peptídicos de una cadena proteica. Los aminoácidos libres resultantes se cuantifican mediante análisis de aminoácidos. Las proteínas se aíslan de organismos vivos (bioquímica, biotecnología...), de alimentos y piensos (lecherías, productos cárnicos y embutidos, cervecerías e industria de bebidas) o de sangre y orina con fines de diagnóstico. La hidrólisis de proteínas con apoyo de microondas en el MARS 6 y el Discover permite la escisión rápida y reproducible de cadenas de péptidos o proteínas. El tiempo de hidrólisis puede reducirse de varias horas a minutos. Además, el equipamiento necesario para la hidrólisis por microondas es menor que para la técnica clásica.
Nota: Este artículo ha sido traducido automáticamente. LUMITOS ofrece este servicio para que la información del producto esté disponible en más idiomas. Como este artículo se ha creado automáticamente, es posible que haya errores y desviaciones respecto al original. La presentación original en Alemán puede encontrarse aquí.
