Robuste und effiziente Aufreinigung von Antikörpern

Toyopearl AF-rProtein-650F bindet Immunoglobulin G (hIgG & mIgG), IgM und Fab Fragmente. Es ideal für das effiziente Capturing von monoklonalen Antikörpern aus konzentrierten Zellkulturlysaten.

Das neue Affinitätsmedium bietet eine hohe Proteinbindekapazität bei schnellen Flussraten sowie eine gute Stabilität gegenüber alkalischen Cleaning-in-Place (CIP) Reinigungslösungen. Mit der Einführung des Toyopearl AF-rProtein-650F hat Tosoh Bioscience die Palette der bekannten Toyopearl Prozessmedien mit einem leistungsfähigen Harz für die Protein A Affinitätschromatographie erweitert. In einer typischen Antikörper Downstream Processing Plattform können nun die chromatographischen Grundoperationen – vom Protein A Capturing über die Zwischenreinigung über Ionenaustauscher bis zum Polishing-Schritt - komplett mit Polymethacrylatharzen der bewährten Toyopearl Serie durchgeführt werden.

Protein A Affinitätschromatographie ist die Standardmethode für das sogenannte Capturing von monoklonalen Antikörpern (mab) im industriellen  Downstream Processing. Die enorme Steigerung der Fermentationstiter führt zu Kapazitätsengpässen bei der Aufreinigung der Zielmoleküle.

Zur Steigerung von  Kapazität und Durchsatz der Aufreinigungsschritte werden neue leistungsfähigere Chromatographiemedien benötigt. Toyopearl AF-rProtein A-650F wurde mit dem Ziel entwickelt, diesen Anforderungen gerecht zu werden und den Engpass zu beheben. Es bietet bei einer kurzen Kontaktzeit von zwei Minuten eine typische dynamische Bindekapazität von über 30 mg  pro ml Harz.

Ein neuentwickelter, rekombinanter Ligand aus nicht tierischer Produktion wurde an das bekannte Methacrylat Basismaterial der Toyopearl Medien gebunden. Die Alkalistabilität des Liganden wurde durch gezielte Mutationen erhöht. Er ist durch mehr als eine Bindung mit der Toyopearl Matrix verbunden und bietet dadurch eine höhere chemische und thermische Stabilität.

In der Praxis wirkt sich das in einem geringen Maß an Protein A Leaching und einer hohen Stabilität gegenüber basischen Waschlösungen aus, die typischerweise in Cleaning-in-Place (CIP) Prozeduren eingesetzt werden. Aufgrund seiner relativ starren Polymermatrix besitzt Toyopearl AF-rProtein A-650F außerdem ausgezeichnete Druck/Flusseigenschaften und ist daher besonders gut in großen Prozesssäulen in der industriellen Produktion einsetzbar.